成果簡介 （主要技術(shù)特征和創(chuàng)新點） |
本發(fā)明公開一種鋅離子金屬螯合層析整體柱的制備方法,，先將亞氨基二乙酸,、殼聚糖,、硫酸鋅制備出的鋅離子螯合劑與四甲氧基硅烷在堿性條件下水解、縮聚,，然后以聚乙二醇和尿素為致孔劑,，在冰浴條件下制得溶膠，從而裝柱得到鋅離子金屬螯合層析整體柱,。本發(fā)明的方法一步即可完成將鋅離子螯合物與硅膠整體柱鍵合，解決了制備金屬螯合整體柱存在的金屬離子鍵合不牢固,、容易脫落等缺點,，該方法制備的鋅離子金屬螯合層析整體柱可用于分離富集萊克多巴胺生物分子。金屬螯合親和層析是近三十年來出現(xiàn)的一種層析技術(shù),，該方法分辨率高,、選擇性好，將具有螯合作用的有機官能團或者螯合劑,，鍵合到不同載體上,，再與過渡金屬離子結(jié)合，從而生產(chǎn)穩(wěn)定的螯合物,。過渡金屬離子能與蛋白質(zhì)表面的一些殘基,，包括組氨酸、半胱氨酸,、色氨酸等進行配位,，可以用于蛋白質(zhì)、酶,、氨基酸等物質(zhì)的分離純化,。 殼聚糖由于分子中存在大量氨基和羥基，具有較好的生物相容性及良好的抗菌性,，同時還可以和多種金屬離子如：Zn2+,、Fe3+、Co2+,、Ni2+,、Cu2+等形成配合物，本研究結(jié)合殼聚糖和鋅離子形成金屬螯合物及硅膠整體柱的優(yōu)點,，采用“一鍋法”設(shè)計合成一種以硅膠為基質(zhì)材料同時鍵合上鋅離子金屬螯合物的整體柱用作固相微萃取方面,，并應(yīng)用在分離富集復(fù)雜樣品中瘦肉精—萊克多巴胺，結(jié)合高效液相色譜檢測,，有效提高分析結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確度,。整體柱的制備采用了原位聚合的方式,，這樣避免了填充柱繁瑣的得顆粒裝填和燒制柱塞等步驟，并且具有更高的柱容量,，同時由于其獨特的孔狀結(jié)構(gòu),，比常規(guī)的填充柱通透性更好，可實現(xiàn)快速分離,。有機-硅膠雜化整體柱結(jié)合了硅膠整體柱機械強度好,、耐高溫、耐有機溶劑的優(yōu)點和有機聚合整體柱制備過程簡單,、pH應(yīng)用范圍廣,、生物相容性好、其通透性及孔徑可調(diào)節(jié),、選材廣泛等優(yōu)點,，越來越受到關(guān)注。 本專利首次將具有親水性的聚合物—瓊脂糖與硅膠通過原為聚合反應(yīng)制備有機-硅膠雜化整體柱,。該整體柱一方面利用了瓊脂糖分子結(jié)構(gòu)中大量活性官能團,，可以對其進一步進行功能化修飾，改善其萃取富集性能,，另一方面利用硅膠本身性質(zhì)穩(wěn)定,、機械強度高并且對敏感的生物大分子極少引起變性等特點。所制備整體柱當(dāng)用于高效富集分析對象時,，可以實現(xiàn)對復(fù)雜實際樣品中分析對象的有效分離和純化,，提高檢測的靈敏度、可靠性和實用性,，可以降低檢測成本,，提高分析檢測效率。 |